Мерки на претпазливост за електрофореза на полиакриламид гел

· полиакриламидГел мора со акриламид мономер, почетен материјал за полимеризација, катализатор и десно од сол и тампон мешавина заедно.

· акриламиди BIS (N, N '- Метилен двоен акриламид) е матрица на гел со мономерна форма.

· Процес на лепило за амониум персулфат. Формулацијата на лепак бара 10% раствор на амониум персулфат подготвен во вода. Повеќето од информациите укажаа на потреба за активна употреба. Сепак, решението од 10% може да се постави на 4 ℃ за неколку недели без значително губење на активност. Направете до 10 ml и отфрлете кога лепилото не успева да се собере.

Совет: Процентот наакриламидпри лепак за секвенционирање и лепак за протеини не е исти. Ако користите predade acrylamide: BIS решение, проверете дали ќе го добиете вистинското шише.

· Temed (N, N, N ', N'- Тетраметил етилендиамин) е катализатор, во кафеаво шише, сместен во фрижидер. Додадете непосредно пред да истурите лепак.

· Полиакриламид Електрофореза што се користи стакло во електрофореза треба да се мие пред и по секој пат. По електрофорезата, измијте со мека четка и крпа во врела вода со сапуница, исплакнете со дестилирана вода и застанете да се исуши.

· Влагата и прашината можат да предизвикаат со шуплив полимер. Пред електрофорезата, исчистете ја стаклената плоча со чистач за стакло и избришете ја со мека четка. Измијте со дестилирана вода и темелно исушете со хартија. Исплакнување со 70% етанол пред да се избрише со хартија помага да се исчисти и забрза сушењето. Додадете примероци од акриламид сукцесивно: бис, вода, тампон раствор, амониум персулфат, temed. Парчејте добро и веднаш истурете.

Не е неопходно да се депонира полиакриламид пред полимеризација. (Акриламид порано се ставаше во вакуум за да се отстранат меурчињата затоа што кислородот ја инхибира полимеризацијата.)

Совети за примерок од хоризонтална точка за лепак.

· Ставете парче црна хартија во долниот дел од кутијата, црна позадина за да направите некои примероци за да видите појасно.
· Тампон на резервоарот за лепак, нешто над колоидот.
· Ако работ има светлина, вклучете ги светлата, оставете светло да сјае колоид. Нацртајте го примерокот во пипета.
· Користење на автоматски уред за пипетирање.
· Во 10-200 MU 1 течна точка на движење може да се користи во повеќето точки на примерокот. За многу мали дупки за примероци (помалку од 10μ1), долгата глава на пипета што се користи за лепак за секвенционирање е поудобна.

· Пипетинг само потопено во примерокот, вдишувајќи полека флуид. Примерокот може да се појави леплив со глицерин, а брзото пумпање може да привлече меурчиња во воздухот во главата на пипетата.

· Примероците по вдишувањето на главата за пипетирање, ќе ја преместат главата на течноста нежно на работ на цевката или бришење хартија цица течна глава надвор од капките. Бидете внимателни да не го цицате примерокот.

Ставете го примерокот во дупката за примероци

· Уредот за пипетирање за да задржите мал притисок, направете ги примероците малку да ја пренесат течната глава.
· Главата за пипетирање вметната во тампон, малку повисока од дупките на самото место, одржува позитивен притисок. Врвот на пипетата може да се вметне во мала дупка.
· Полека и стабилно примероците надвор. Врвот на пипетата е поставен над дупката за примерок од точката, а примерокот ќе потоне во дупката. Оставете го примерокот да тоне за да ја наполни дупката за примероци наместо да влегува.
· Откако последната капка примерок со течна глава, течноста ќе се пресели во втората нога, полека подигнете го течниот потег, тргнете се од тампон

Како да направите земање примероци од вертикално лепак?

· Вертикални дупки за примерок од точката на лепак формирани помеѓу две парчиња стакло. Во многу тенок лепак, главата на пипета не може дури и да се вметне помеѓу две стаклени плочи. Гледајте го глицерин! Ставете ја главата на пипетата над дупката за примерокот и примерокот ќе потоне во дупката.
· Примерок од точка Пред, не заборавајте да ја ставите вертикалната точка на дупката за примерок од полипропилен ацил гел се исплакнува чиста. Измијте ги неполимеризираниот акриламид и водата што може да се појави на дното на дупката за примерокот. Водата може да ја направи дупката за примерок значително помала. Користете шприц од 25 ml или 50 ml и игла со 18 мерачи. Истурете во тампон за електрофореза и внимателно испрскајте ја дупката за примероци.
· Може да биде тешко да се види дупката за примероци, но во исто, остатокот е лесен. Ако има вишок дупки, тампон за примероци може да се тестира со бромофенол сина боја.